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    鮭魚胚胎細(xì)胞試驗(yàn)都操作說(shuō)明

    點(diǎn)擊次數(shù):55  更新時(shí)間:2025-09-12
    鮭魚胚胎細(xì)胞(CHSE細(xì)胞)是一種重要的實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞系,主要來(lái)源于鮭魚胚胎,具有成纖維細(xì)胞樣形態(tài)和貼壁生長(zhǎng)特性‌。這類細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)研究中常用于病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)、細(xì)胞分化機(jī)制等實(shí)驗(yàn),尤其在海洋生物研究中應(yīng)用廣泛‌。
    操作說(shuō)明:
    1)對(duì)于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運(yùn)輸問(wèn)題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運(yùn)輸問(wèn)題,請(qǐng)75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,嚴(yán)格按照說(shuō)明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過(guò)郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。
    2)對(duì)于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,請(qǐng)取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
    注意事項(xiàng):
    1)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決。
    2)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度。
    3)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng),而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
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