傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

ihESCs永生化人子宮內(nèi)膜異位基質細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據(jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

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動物星形膠質細胞培養(yǎng)基AM-a 小鼠IL2誘導T細胞激酶(ITK)ELISA試劑盒 SOCS3： 細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗體 NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質瘤細胞

Promocell C-27410 Preadipocyte Growth Medium, 前脂肪細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 SOD1： 超氧化物歧化酶1抗體 CL-0235TSCCa(人舌鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2

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人張氏肝細胞;Chang liver 小鼠IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA試劑盒 SOD3： 超氧化物歧化酶3抗體 人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572) 大鼠腦膜細胞培養(yǎng)基 100mL

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)ELISA試劑盒 SODD： Bcl2結合抗凋亡蛋白4抗體 非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C

腎動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 HBeAg(立可讀) 乙型肝炎e抗原 96T

MyoGEF： 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 小鼠肺腺癌細胞系;LA795

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IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標簽) 大鼠抑制素結合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 HBcAb(立可讀) 乙型肝炎核心抗體 VDR Others Human 人 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腎足突細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠抑制素結合蛋白(INHBP)ELISA 試劑盒 HBcAb(IgM) 乙型肝炎核心抗體 Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞 肌母細胞,L-6TG細胞 Cates-1B(人淋巴胚胎性癌細胞)

ihESCs永生化人子宮內(nèi)膜異位基質細胞SF767(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人抗副流感病毒IgG抗體(ai-PIV IgG )ELISA 試劑盒 NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 合成酶-3(抗原) 0.5mg

HPV18 E6 protein： 人類狀瘤病毒18 E6抗體 CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)

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IL25 Others Rat 大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 人細胞裂解液 (陽性對照) 人抗風疹病毒IgG抗體(ai-RV IgG)ELISA 試劑盒 NR2B (Glutamate receptor) 谷酸受體(抗原) 0.5mg