HLF人肺成纖維樣細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GCP3： γ-微管蛋白復(fù)合物GCP3抗體 大鼠骨髓瘤細(xì)胞;IR983F

NCI-H661(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA 試劑盒 IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml

GAMT： 胍基乙酸N甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)(5×105)

人肺成纖維細(xì)胞總RNAHPF NA 人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3(AF3)ELISA試劑盒 IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgM 0.1ml

GANC： α-葡萄糖苷酶C抗體 雜交瘤(B類(lèi));Z153A2A5B3A12 小鼠牙細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)ELISA 試劑盒 HABP(Mouse Hya]uronate binding protein)  小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 96T

NCR1： 細(xì)胞毒性受體NK-p46抗體 MFC細(xì)胞，胃癌細(xì)胞 綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞,MGC803-GFP細(xì)胞 恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]

IgG2a Others Mouse 小鼠 IgG2a-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠胎兒腎鈣黏蛋白(KCAD)ELISA試劑盒 CyPA(Mouse cyclophilin A)  小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A 96T

NCR3： 細(xì)胞毒性受體NK-p30抗體 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MEpiCGS

RAG小鼠腎腺癌細(xì)胞 RAG mice renal adenocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS 大鼠羧肽酶N2(CPN2)ELISA試劑盒 BMPs  大鼠骨形成蛋白 96T

HLF人肺成纖維樣細(xì)胞IFRD1： 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細(xì)胞，A-704細(xì)胞 AGS(胃腺癌細(xì)胞)

CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒 ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原 0.5mg

ILP2： 抑制細(xì)胞凋亡樣蛋白2抗體 CM-H047人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SAC-II B2細(xì)胞，小鼠腹水瘤細(xì)胞 BRL 3A(大鼠肝細(xì)胞) 人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1 人白介素17A(IL-17A)ELISA 試劑盒 OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原 0.5ml

IFITM1： 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)