細胞培養操作：

收貨處理取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養

傳代代數可傳5代左右；3代以內狀態最佳

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法

1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4.待細胞貼壁后，培養觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。

CO? 獨立培養基二氧化碳獨立培養基采用磷酸鹽緩沖體系。配方中含有少量以滿足必需的碳酸氫鹽依賴性功能。由于不使用合成緩沖液如Hepes，因此消除了與此類緩沖系統相關的細胞毒性效應。另外，該培養基的優化配方可提高細胞生產和 CO2 利用率，因此無需外源性 CO2 即可維持 CO2 依賴性細胞功能。

二氧化碳獨立培養基用于支持各種懸浮和貼壁的哺乳動物細胞生長，例如上皮細胞、成纖維細胞和淋巴樣細胞系，而不需要 CO2 培養箱。

該培養基是在大氣條件下運輸細胞或組織以及處理小鼠胚胎的理想選擇。如需長期培養，建議使用傳統標準二氧化碳依賴型培養基。

本產品使用注射用水（Water-For-Injection）配置。

培養基主要成份表

含有（＋）

（＋）  D-葡萄糖

（＋）  丙酮酸鈉

（＋）  酚紅

不含（－）

（－）  HEPES

運輸

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法

基礎培養基2℃～8℃，培養添加劑 -20℃，避光，保存12個月。配置好的培養基2℃～8℃保存1-2個月。

質量控制

注意事項

1、收到產品請先檢查包裝是否完好，如有破損，漏液、渾濁等現象請及時聯系我們，培養基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響產品正常使用。

2、請仔細閱讀產品說明書，了解產品使用方法、保存方式、有效期等信息，若因操作失誤，保存不當而導致產品出現污染等問題的，責任由客戶自行承擔。

3、本產品僅能用于科研，培養基中的一些組分對人體有較低的危害性，如有接觸立即用大量清水沖洗即可。

細胞培養概念：

細胞培養（cell culture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。

細胞培養可分為原代培養和傳代培養；直接從體內獲取的組織細胞進行培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養，即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器（同樣底面積的容器）中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。

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